菌種名稱：棕色固氮菌

英文名稱：Azotobacter vinelandii

培養基 胰蛋白胨：15.0，大豆胨：5.0，氯化鈉：5.0，瓊脂：15.0，pH：7.3±0.2(25℃) 

生長條件 30℃；18-24h；好氧 

存儲條件 2-8℃ 

安全等級 1 

形態 大小：0.5-1mm 形狀：圓形 邊緣：整齊 透明度：不透明 顏色：淡黃色 隆起度：中間凸起 表面：明亮光滑 質地：濕潤易挑起 

模式菌株 no 

操作步驟 ①準備1支含有5~10mL液體培養基或無菌水的試管和2個平板；②安全柜中打開，用酒精燈灼燒頂部，后迅速滴上無菌水使之破裂，隨后用鑷子將其敲碎；③吸取0.5mL液體培養基打入凍干管，充分溶解后重新打回液體試管中，混勻；④吸取0.2mL菌懸液打入平板中，涂布均勻，重復兩次獲得兩個平板；⑤置于上述培養條件下培養，菌種長出即可使用。 

注意事項：

1.微生物菌種應保存于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；

2.棕色固氮菌操作在無菌條件下進行，接種完畢應該滅菌再做丟棄處理；

3.斜面菌種和穿刺菌種保存時間通常為 3-6 個月，應根據菌種狀況及時結轉；凍干粉保存時間通常是 2-25 年；甘油菌保存時間為 2-5 年。

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