菌種名稱：艱難梭菌

英文名稱：Clostridium difficile

培養基 特殊蛋白胨：23.0，可溶性淀粉：1.0，氯化鈉：5.0，瓊脂：10.0，脫纖維羊血：5%(50℃添加)，pH：7.3±0.2（25℃） 

生長條件 37℃；48-72h；厭氧 

存儲條件 -80℃ 

安全等級 2 

形態 菌落直徑為0.5-1mm，圓形，邊緣不規則，不透明，正面灰白色，中間凸起，表面光滑，質地濕潤，易挑起，G＋（藍紫色），桿菌 

模式菌株 no 

操作步驟 ①準備上述平板2塊；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打開，用酒精燈灼燒頂部，后迅速滴上無菌水使之破裂，隨后用鑷子將其敲碎；③吸取0.5mL無菌水（置于厭氧環境平衡24h）打入凍干管，充分溶解菌粉后，打入2塊平板，200μL/個，涂布均勻；④將平板置于上述培養條件下培養，菌種長出即可使用。 

注意事項：

1.微生物菌種應保存于低溫、清潔和干燥的地方，室溫放置時間過長會導致菌種衰退；

2.艱難梭菌操作在無菌條件下進行，接種完畢應該滅菌再做丟棄處理；

3.斜面菌種和穿刺菌種保存時間通常為 3-6 個月，應根據菌種狀況及時結轉；凍干粉保存時間通常是 2-25 年；甘油菌保存時間為 2-5 年。

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