兔腦炎微孢子蟲抗體IgM ELISA試劑盒
保存條件及有效期
1.試劑盒保存：2-8℃。
2.有效期：6個月
實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中兔腦炎微孢子蟲抗體 IgM(E. cuniculi IgM)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中腦炎微孢子蟲抗體 IgM(E. cuniculi IgM) 相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與 HRP 標(biāo)記的抗原結(jié)合，形成抗原-抗體
-酶標(biāo)抗原復(fù)合物，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色， 并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值)，與 CUTOFF 值相比較，從而判定標(biāo)本中兔腦炎微孢子蟲抗體 IgM(E. cuniculi IgM)的存在與否。
試劑盒組成
130 倍濃縮洗滌液20ml×1 瓶7終止液6ml×1 瓶
2酶標(biāo)試劑6ml×1 瓶8陽性對照0.5ml×1 瓶
3酶標(biāo)包被板12 孔×8 條9陰性對照0.5ml×1 瓶
4樣品稀釋液6ml×1 瓶10說明書1 份
5顯色劑A 液6ml×1 瓶11封板膜2 張
6顯色劑 B 液6ml×1/瓶12密封袋1 個
操作步驟
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1
孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)
2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此重復(fù) 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定：以空白孔調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
計算和結(jié)果判定
試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.20 臨界值(CUT OFF)計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品 OD 值< 臨界值(CUT OFF)者為兔腦炎微孢子蟲抗體 IgM(E. cuniculi IgM)陰性
陽性判定：樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為兔腦炎微孢子蟲抗體 IgM(E. cuniculi IgM)陽性。
注意事項
1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號組分不得混用。
2.兔腦炎微孢子蟲抗體IgM ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長檢測時，參考波長為 630nm
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸，使用時必須注意安全。
021-62457717
PRODUCT
當(dāng)前位置：
電子郵箱：
公司地址：上海市奉賢區(qū)金海公路3265號14幢11545室