產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本產(chǎn)品是在動(dòng)物 DNA 純化試劑盒基礎(chǔ)上優(yōu)化改良而得，專門針對(duì)海洋動(dòng)物及其他軟體動(dòng)物的基因組 DNA 提取的試劑盒，可用于魚類、蝦類、貝類、烏賊、蝸牛等動(dòng)物，可以有效去除海洋動(dòng)物及其他軟體動(dòng)物組織中的蛋白、脂肪及其他有機(jī)化合物等雜質(zhì)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.使用本試劑盒提取的基因組 DNA 可適用于各種常規(guī)分子生物學(xué)操作，如:酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等試驗(yàn)。

2.提取到的基因組 DNA 完整性，其中最長(zhǎng)可以到達(dá)長(zhǎng)度一般在 20-50kb。

3.DNA 純凈，OD260/280 一般都在 1.9 左右、DNA 片段大小在 30-50Kb 左右，可直接用于 PCR、酶切、雜交等。

4.操作簡(jiǎn)單安全，1 小時(shí)內(nèi)即可獲得超純的基因組 DNA，純化過程中不需要使用苯-酚氯仿等有機(jī)試劑。

5.應(yīng)用廣泛，適用于多種動(dòng)物細(xì)胞和動(dòng)物組織等。

6.性價(jià)比高，質(zhì)量和國(guó)外同類試劑盒相當(dāng)，價(jià)格更低。

7.海洋動(dòng)物 DNA 純化試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分規(guī)格包裝

海洋動(dòng)物 DNA 純化溶液 A50mL60mL 本色瓶

海洋動(dòng)物 DNA 純化溶液 B15mL20mL 棕色瓶

海洋動(dòng)物 DNA 純化溶液 C50mL60mL 本色瓶

蛋白酶 K 溶液，10mg/mL1mL1.5mL 白蓋管

通用洗柱液50mL60mL 本色瓶

DNA 洗脫液

（基因組純化專用）10mL10mL 本色瓶

離心吸附柱50 套塑料袋

使用手冊(cè)1 份無

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸和保存，但蛋白酶 K 溶液(10mg/mL)需要低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期

一年。

自備試劑

無水乙醇、RNase A 溶液（100mg/mL）

使用方法：

1.使用前請(qǐng)先在海洋動(dòng)物 DNA 純化溶液 C 中加入 17mL 自備的無水乙醇，在專用洗柱液中加入 60mL 的自備無水乙醇。

2.切取不多于 30mg 的海洋動(dòng)物及其他軟體組織材料，放入裝有 200μL 海洋動(dòng)物

DNA 純化溶液 A 的離心管中，渦旋振蕩 15 秒。注意：根據(jù)提取的組織不同，起始量也稍有不同，腮的細(xì)胞量較大，一般建議提取量不超過 20mg。如果需要去除 RNA，可加入自備的 40μL RNase A（100mg/mL）溶液，振蕩 15 秒，室溫放置 5 分鐘。

3.加入 20μL 蛋白酶 K 溶液，渦旋混勻，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。在 56℃下放置，直至海洋動(dòng)物組織完-全溶解，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠，再進(jìn)行下一步驟。注意：不同動(dòng)物組織裂解時(shí)間不同，通常需 0.5-2 小時(shí)即可完成。扇貝組織 0.5 小時(shí)基本可裂解完-全，蝦和魚類組織 1 小時(shí)。每小時(shí)振蕩混合樣品 2-3 次，每次振蕩混勻 15 秒。

4.加入 200μL 海洋動(dòng)物 DNA 純化溶液 B，充分顛倒混勻，70℃放置 10 分鐘，溶液應(yīng)變清亮，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。注意：加入海洋動(dòng)物 DNA 純化溶液 B 時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生白色沉淀，一般 70℃放置時(shí)會(huì)消失，不會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮，說明細(xì)胞裂解不徹-底，可能導(dǎo)致提取 DNA 量少和提取出的DNA 不純。

5.在混合液中加入 200μL 無水乙醇，充分顛倒混勻，此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀，簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。

6.將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)硅膠膜離心吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm 離心 30 秒，倒掉廢液，將吸附柱放回收集管中。

7.向離心吸附柱中加入 500μL 海洋動(dòng)物 DNA 純化溶液 C，12,000rpm 離心 30秒，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中。

8.向吸附柱中加入 600μL 專用洗柱液，12,000rpm 離心 30 秒，倒掉廢液，將吸附柱放入收集管中。

9.重復(fù)上步操作一次。

10.將硅膠膜吸附柱放回收集管中，12,000rpm 離心 2 分鐘，倒掉廢液。將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘，以徹-底晾干吸附材料中殘余的專用洗柱液。注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的專用洗柱液去除，否則其中的乙醇?xì)埩魰?huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、PCR 等）實(shí)驗(yàn)。

11.將硅膠膜離心吸附柱轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200μLDNA 洗脫液（基因組純化專用），室溫放置 2-5 分鐘，12,000rpm離心 1 分鐘，將溶液收集到離心管中。注意：專用 DNA 洗脫液的體積不應(yīng)少于 50μL，體積過小影響回收效率。為增加基因組 DNA 的得率，可將離心得到的溶液再加入吸附柱中，室溫放置 2 分鐘，12,000rpm 離心 1 分鐘。洗脫液

的 pH 值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用超純水做洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在7.0-8.5 范圍內(nèi)，pH 值低于 7.0 會(huì)降低洗脫效率；且 DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防 DNA 降解。

選擇我們的海洋動(dòng)物 DNA 純化試劑盒（過柱法），就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！