產品簡介：

本產品是本公司根據很多植物多糖多酚的特點而專門開發的 RNA 純化試劑盒，其提取純化效果在 100 多種各類植物中得到驗證。

產品特點：

1.操作更加簡單快速，處理一個樣品只需要約十分鐘。

2.所得到的 RNA 平均 OD260/280 在 2.0 左右。

3.含有專門去除多糖和多酚的成分，污染殘留少。

4.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、RT-LAMP、Northern 雜交、cDNA 合成等后續實驗。

5.性價比高于進口的柱式植物 RNA 提取產品。

6.本產品不適合純化植物小RNA。

7.多糖多酚植物RNA提取試劑盒（過柱法）只能用于科研。

產品參數：

成分規格包裝

植物 RNA 提取溶液 A50 mL60 mL 本色瓶

植物 RNA 提取溶液 B15 mL15 mL 棕玻瓶

植物 RNA 提取溶液 C50 mL60 mL 本色瓶

離心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

RNA 洗脫液10 mL10 mL 本色瓶

使用手冊1 份無

運輸及保存

常溫運輸和保存，溶液 B 需要 4℃保存，有效期一年。

自備試劑

氯仿。

使用方法：

注意：植物 RNA 提取溶液 A 在 4℃放置后可能會產生沉淀，使用前必須放在 65℃水浴使沉淀徹-底溶解并充分搖勻后才能取用。

1.每次微量提取需要 100-200 mg 植物葉片、或 50-100 mg 植物種子、或

200-500 mg 植物果實。

2.樣品破碎：

1)勻漿法：先將新鮮植物組織-剪切成小塊，放入 10-15 mL 塑料離心管中，加入 1 mL 植物 RNA 提取溶液 A，然后用Polytron 剪切式勻漿器勻漿 5-20秒，然后見勻漿液轉移到 1.5mL 塑料離心管中。勻漿時會產生泡沫，但不影響提取效果。不能用玻璃的、分離線粒體和葉綠體的勻漿器。

2)液氮研磨法（適用于復雜，易降解樣品）：取適量新鮮植物組織放入含液氮的研缽中，迅速將組織研磨成粉末后，將粉末轉移到 1.5 mL 的塑料離心管中，加入 1 mL 植物 RNA 提取溶液A，立即劇烈振蕩 20 秒，充分混勻。

3.在裝有勻漿液或研磨物的 1.5mL 離心管中加入 0.3 mL 的植物RNA 提取溶液B 和 0.2 mL 自備氯仿，在振蕩器上振蕩 30 秒混勻，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。

4.室溫 13000 g 離心 5 分鐘，兩相間將有約 5-10 毫米厚的細胞破碎物。

5.將上清液(約 0.6 mL)轉移到另一干凈的 1.5 mL 塑料離心管中，下層有機相和中間層含有 DNA、蛋白質和其他雜質，避免觸及或吸取。

6.加入等體積的植物 RNA 提取溶液 C，充分顛倒混勻。如果有沉淀產生（對某些植物，屬于正常現象），千萬不要去掉沉淀。

7.將一半的溶液（如果有沉淀，則先混勻后一起取用）轉移到離心吸附柱中，13000  g 室溫離心半分鐘，棄穿透液。

8.將剩下的一半溶液（如果有沉淀，則先混勻后一起取用）轉移到同一離心吸附柱中，13000 g 室溫離心半分鐘，棄穿透液。

9.加 0.7 mL 通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。再加 0.3 mL 通用洗柱液， 室溫離心半分鐘，棄穿透液。

10.室溫離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的洗柱液會影響 RNA 的使用。

11.將離心吸附柱轉移到一個自備的干凈的RNase-free 收集管中，加入 50 μL RNA

洗脫液，室溫放置 1 分鐘。

12.13000 g 室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為 RNA 樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

13.RNA 完整性的電泳檢測：如果需要做 Northern 雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行 RNA 電泳，因為非變性膠不能分離所有的 RNA 分子（BioTechniques， 28：414，2000）。如果電泳發現 DNA 污染嚴重（跟樣品相關）建議使用含有RNase-free DNase 處理步驟的植物 RNA 純化試劑盒（過柱法，含 DNase），也可以另購 RNase-free DNase 降解 DNA。

14.RNA 產量產率測定：將 1μL RNA 跟 1uLTE 緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)混合，然后在 NanoDrop 上測其在 OD260 的光吸收和濃度，進而計算出 RNA 的產量

（濃度×體積)和產率(RNA 產量/植物組織用量)。

15.RNA 純度測定：無污染的總 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之間，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質污染，但一般不影響 RT-PCR 等反應。

選擇我們的多糖多酚植物RNA提取試劑盒（過柱法），就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！