產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

革 蘭 氏 陰 性 細(xì) 菌 （ 如 大 腸 桿 菌 ） 的 細(xì) 胞 表 面 的 結(jié) 構(gòu) 成 分 LPS（lipopolysaccharides，脂多糖）就是內(nèi)毒素，因此從革蘭氏陰性細(xì)菌，如大腸桿菌，中純化的重組蛋白幾乎都有內(nèi)毒素污染。內(nèi)毒素對(duì)原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞  和整體動(dòng)物均具有顯著的毒性作用，這也是為何被叫做內(nèi)毒素的原因。因此去除  蛋白樣本中的內(nèi)毒素具有重要的意義。本產(chǎn)品就是專(zhuān)門(mén)用于高效去除蛋白樣品中  的內(nèi)毒素污染的試劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.操作簡(jiǎn)單，不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。

2.高效，一次處理可以去除 95%以上的內(nèi)毒素。

3.不影響蛋白質(zhì)的活性和完整性，處理過(guò)的蛋白可以直接用于后續(xù)的各種實(shí)驗(yàn)， 包括抗體制備或其他活體細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。

4.適用范圍廣，可用于處理各種水溶性蛋白質(zhì)，但本產(chǎn)品不能用于膜蛋白和疏水蛋白溶液。

5.既可小規(guī)模使用(在 1.5 mL 離心管內(nèi))，也可放量使用。

6.本產(chǎn)品提供的試劑足夠進(jìn)行 50 次處理（每次處理 500 μL 樣本，每個(gè)樣本處理三次）。

7.本產(chǎn)品只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

成份規(guī)格包裝

蛋白溶液內(nèi)毒素清除劑1.5 mL1.5 mL 藍(lán)蓋管

使用手冊(cè)1 份1 份

運(yùn)輸及保存

常溫運(yùn)輸和保存，有效期兩年。

自備試劑

無(wú)內(nèi)毒素水。

使用方法：

注意：緩沖體系需避免高鹽，需保持 pH 在 6.0-8.0；體系還需避免干擾物質(zhì)如： 強(qiáng)氧化劑、還原劑（DTT）；金屬離子可能會(huì)影響分相效率，必要時(shí)可以添加 EDTA等螯合劑；如果需實(shí)驗(yàn)對(duì)毒性有要求可在得到去除內(nèi)毒素的蛋白溶液后進(jìn)行透析、疏水層析等。

一：微量處理（用于體積小于 500 μL 樣品）

1. 可調(diào)溫度的離心機(jī)調(diào)至 37℃預(yù)熱，不可調(diào)節(jié)溫度的離心機(jī)放在 37℃孵化箱

中預(yù)熱。

2.蛋白溶液內(nèi)毒素 清除劑和待處理蛋白溶液需要在冰上預(yù)冷 5-10 min。

3.在一干凈的 1.5 mL 的塑料離心管中加入濃度為 10 mg/mL 的 500 μL 的待處理蛋白溶液。如果體積不足 500 μL，可以用自備的水補(bǔ)足到 500 μL。

4.加入 10 μL 蛋白溶液內(nèi)毒素 清除劑。

5.充分震蕩 1 分鐘混勻，此時(shí)呈混濁狀。

6.插冰中搖床上搖晃 30 分鐘。

7.放置在 37℃保溫 10 分鐘。

8.經(jīng) 37℃預(yù)熱的可調(diào)溫度的離心機(jī)或不可調(diào)溫度的離心機(jī)預(yù)熱后立刻室溫15,000×g 離心 20 分鐘，液體將分為上下兩層。注意：此步不能低溫離心。

9.小心將上清（含蛋白質(zhì)）轉(zhuǎn)移到新的離心管中，注意不要吸取下層（含內(nèi)毒  素）的液體。

10.重復(fù)第 4 步到第 9 步兩次（從加入 10 μL 蛋白溶液內(nèi)毒素 清除劑到取出上清）。

11.將裝有上清的離心管放入臺(tái)式離心機(jī)，室溫 15,000×g 離心 20 分鐘，離心后小心轉(zhuǎn)移上清到一新的離心管中，管底可能有少量油滴狀液體，不要觸  及。注意：此步不能低溫離心。

12.所得上清液就是去除內(nèi)毒素后的蛋白溶液，可以直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。  

二：用于體積大于 500 μL 的蛋白樣品

13.整個(gè)操作同上，只是在 15 或 50 mL 塑料離心管中進(jìn)行，離心速度不能超過(guò)離心管的承受力。

選擇我們的蛋白溶液內(nèi)毒素清除劑，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！