產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本產(chǎn)品是用于MDA（Multiplex Displacement Amplification）技術(shù)的全基因組DNA擴(kuò)增試劑盒，它利用隨機(jī)引物結(jié)合在全基因組（變性后）的不同位 置，然后利用具有超長(zhǎng)DNA合成能力的phi29 DNA聚合酶，進(jìn)行鏈取代合成。MDA擴(kuò)增DNA的示意圖如下：

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超-強(qiáng)鏈取代能力，故所得擴(kuò)增DNA突變率比PCR低至少10倍。

2.可以將基因組DNA擴(kuò)增上萬(wàn)倍，非常適用于痕量珍貴樣品。

3.可使用各種來(lái)源的樣品，尤其是痕量法醫(yī)樣品，包括全血，干血，發(fā)根，口腔粘膜刮液培養(yǎng)細(xì)胞，真菌和病毒等。

4.操作簡(jiǎn)便快捷，恒溫（30℃）反應(yīng)，無(wú)須貴重PCR儀即可實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增。

5.含有熒光染料，故可以實(shí)時(shí)檢測(cè)擴(kuò)增效果，不需要反應(yīng)結(jié)束后電泳檢測(cè)，避免浪費(fèi)寶貴的擴(kuò)增產(chǎn)物。

6.產(chǎn)物可用于多種后續(xù)試驗(yàn)，包括多重PCR、長(zhǎng)片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫(kù)構(gòu)建、單倍型分析、測(cè)序、基因芯片分析、各種遺傳分析（片段差異， 微衛(wèi)星差異，SNP，STR）等。

7.本產(chǎn)品足夠30次20 ?L體系的全基因組擴(kuò)增。

8.實(shí)時(shí)全基因組擴(kuò)增試劑盒（MDA 熒光染料法）只能用于科研，且只適用于擴(kuò)增純化好的基因組DNA。

產(chǎn)品參數(shù)：

成分 規(guī)格包裝

溶液A 30 μL0.5 mL 藍(lán)色蓋

MDA 專用隨機(jī)引物溶液 60 μL0.5 mL 棕色管

20×飽和染料30 μL0.5 mL 棕色管

10×DNA 環(huán)化-擴(kuò)增緩沖液 60 μL0.5 mL 綠色蓋

dNTP（25 mM） 30 μL0.5 mL 白色蓋

DNA 環(huán)化酶A 15 μL0.5 mL 紫色蓋

DNA 環(huán)化酶B 15 μL0.5 mL 紫色蓋

Phi 29 DNA 聚合酶

（10 U/μL） 15 μL0.5 mL 紅色蓋

使用手冊(cè) 1 份無(wú)

運(yùn)輸及保存

低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

純化好的基因組 DNA

使用方法：

1如果有 N 個(gè) DNA 模板，則標(biāo)記 2N 個(gè)PCR 管，多出的一組為不加模板的陰性對(duì)照管。

2設(shè)置 20 μL 的擴(kuò)增反應(yīng)

330℃保溫 12 小時(shí)。最好使用PCR 儀進(jìn)行 30℃保溫（注意：不是 37℃）并打開(kāi)熱蓋保溫。每 10 分鐘設(shè)置成一個(gè)循環(huán)，采集一次 SYBR 通道的熒光信號(hào)。由于是可以實(shí)時(shí)檢測(cè)反應(yīng)，所以反應(yīng)不一定要在設(shè)置時(shí)間到達(dá)后結(jié)束，可以在擴(kuò)增曲線進(jìn)入平臺(tái)期后（已經(jīng)沒(méi)有新的 DNA 合成）結(jié)束。

465℃保溫 10 分鐘使phi29 DNA 聚合酶滅活。注：由于 phi29 DNA 聚合酶有 DNA 外切活性，所以最好將其滅活以免干擾后續(xù)反應(yīng)。

5典型實(shí)驗(yàn)結(jié)果。有擴(kuò)增的樣本將有平緩的 S 熒光曲線，無(wú)模板對(duì)照將沒(méi)有此標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增曲線或擴(kuò)增曲線。

6若采用 30℃金屬浴或水浴，必須在樣品管中加入 50 μL 石蠟油以防水分蒸發(fā)，使用電泳檢測(cè)或 PCR 檢測(cè)是否有擴(kuò)增。

7擴(kuò)增所得 DNA 可以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

選擇我們的實(shí)時(shí)全基因組擴(kuò)增試劑盒（MDA 熒光染料法），就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！