間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.’最后一遍用DDW洗滌。

其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

規格：96T/48T

產品用途：科研 實驗

公司服務：ELISA試劑盒 免費代測

經營品牌：RD

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：2-8℃。

2．有效期：6個月

運輸條件：低溫運輸，用干冰或者冰袋低溫運輸。

安全性

1．避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

2．實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。

3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

操作實驗要點：

專一性強：抗原與抗體的免疫反應是專一反應。

靈敏度高：大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

樣品易保存：經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。

結果易觀察：對檢測結果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。

ELISA 酶結合物的制備：

 免疫酶技術又稱酶免疫測定法,是繼免疫熒光技術和放射免疫技術后發展起來的又一種免疫標記技術。

 它是把抗原抗體的特異性反應和酶的高效催化作用相結合而建立的。

 技術通過化學方法將酶與抗體或抗抗體結合，形成酶標記物，這些酶標記物仍保持免疫學活性和酶的活性。

 然后將它與相應的抗體或抗原起反應，形成酶標記復合物，結合在免疫復合物上的酶，在遇到相應的底物時，則催化底物產生水解、氧化或還原等反應，而生成可溶性或不溶性有色物質。

 然后根據顯色的深淺來反映待測樣品中抗原或抗體的含量，如生成的有色物質為可溶性，則可用肉眼比色或酶標測定儀測定光密度值（OD）定性或定量。