酶聯免疫吸附測定（enzyme linked immunosorbent assay，簡寫ELISA或ELASA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。酶聯免疫吸附測定（ELISA）為免疫學中的經典實驗，本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點等方面對其進行了詳細介紹。

中文名

酶聯免疫吸附劑測定

外文名

enzyme linked immunosorbent assay

簡寫

ELISA或ELASA

類型

概念

雙夾心ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒) 此法與雙抗體夾心ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)的主要區別在于：它是采用酶標抗抗體檢查多種大分子抗原，它不僅不必標記每一種抗體，還可提高試驗的敏感性。此法的基本程序為：

① 加抗體（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干

② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

③ 加用非同種動物生產的特異性抗體（Ab-2）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

④ 加入酶標抗Ab-2抗體（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干

⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液

⑥ 用ELISA(酶聯免疫吸附試驗,酶聯免疫試劑盒)檢測儀測定OD值。結果判定 已知陽性血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且已知陽性血清的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下，如果待檢血清與已知陰性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待檢血清的OD值≥0.4，則判為陽性，否則判為陰性。