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酶聯免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay,簡寫ELISA或ELASA)指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上,利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。酶聯免疫吸附測定(ELISA)為免疫學中的經典實驗,本詞條從定義、基本原理、分類方法、操作要點等方面對其進行了詳細介紹。
中文名
酶聯免疫吸附劑測定
外文名
enzyme linked immunosorbent assay
簡寫
ELISA或ELASA
類型
概念
| 分類方法 常用的ELISA可以分為以下五大類:①直接ELISA;②間接ELISA;③夾心ELISA;④競爭ELISA;⑤競爭抑制ELISA。其他的ELISA都隸屬于這五類ELISA或由這五類ELISA組合衍生。 |

用于標記的酶 用于標記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩定;反應產物易于顯現;能商品化生產。應用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應用*。
1.辣根過氧化物酶(HRP) 過氧化物酶廣泛分布于植物中,辣根中含量最高,從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶(HRP),是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構成的一種糖蛋白(含糖量18%),分子量約40 000,約由300個氨基酸組成,等電點為pH 3-9,催化反應的最適pH值因供氫體不同而稍有差異,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的硫酸銨溶液。酶蛋白和輔基的最大吸收光譜分別為275nm和403nm。
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